在生物制藥、蛋白純化與天然產物分離中，工業級層析柱的運行狀態直接影響產品收率、純度與工藝穩定性。長期使用中常因操作不當、樣品污染或填料老化引發各類問題。掌握
工業級層析柱的常見問題診斷與高效解決方法，是確保其正常工作的關鍵。
1、背壓異常升高
檢查柱頭篩板堵塞或填料壓實。嘗試反向沖洗（若柱體允許）5–10倍柱體積去離子水，清除顆粒物。檢查樣品是否未過濾（建議用0.22μm濾膜預處理）。若為硅膠柱，避免使用高pH緩沖液導致溶膠。嚴重堵塞需拆柱更換篩板或重新裝填。
2、柱效下降或峰形拖尾
多因填料污染或溝流所致。執行深度清洗：用1–2MNaCl溶液去除離子吸附；0.5MNaOH沖洗1小時去蛋白殘留；70%乙醇循環30分鐘殺菌去脂。若仍無效，可能填料已老化，需更換新介質。
3、分離度降低或峰合并
檢查上樣量是否超載，減少進樣體積或濃度。確認流速是否過快，降低至推薦值（如300cm/h）。檢查緩沖液pH與電導是否準確，重新配制并校準。若為離子交換柱，檢查再生是否完成。
4、填料塌陷或產生氣泡
多因干柱或壓力驟變引起。嚴禁排干，保存時始終充滿液體。若已干裂，可嘗試低流速水化恢復。系統脫氣不充分會導致氣泡滯留，影響分離。上樣前對所有溶液進行脫氣處理。
5、柱體泄漏或接口滲液
檢查端蓋密封圈是否老化、變形或安裝不當。更換O型圈，涂抹硅脂增強密封。確認柱體螺紋是否擰緊，但避免過力導致破裂。定期檢查高壓接頭與管路連接。
6、保留時間漂移
多為溫度波動或緩沖液成分變化。確保系統恒溫（±1℃），避免環境溫差。檢查泵混合比例是否準確，定期校準。確認柱平衡是否充分（電導與pH穩定），避免批次間差異。
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